تكون في حال ظهور الخطين أيضًا، ولكن يكون خط الاختبار أخف لونًا من خط التحكم، مما يعني عدم وصول مستوى هرمون اللوتين إلى الحد الأدنى لإطلاق نتيجة إيجابية، كما أن ظهور خط التحكم فقط دون وجود خط اختبار مرئي يعني عدم وصول مستوى الهرمون للحد الأدنى اللازم للحصول على نتيجة إيجابية،